CSU confocal de disco giratório

Tecnologia confocal de disco giratório duplo

Como pioneira na tecnologia confocal de disco giratório duplo, a Yokogawa revolucionou a geração de imagens de células vivas na microscopia óptica. O método de varredura de múltiplos feixes oferece não apenas imagens de alta velocidade, mas reduz significativamente a fototoxicidade e o branqueamento de fotos, tornando nossas unidades de scanner confocal a ferramenta padrão de fato para imagens de células vivas.

Aquisição de imagens de alta velocidade e alta resolução

Os scanners confocais da Yokogawa empregam tecnologias avançadas de geração de imagens para ajudar os pesquisadores a obter imagens de células vivas de alta velocidade e alta resolução.

  • Imagens confocais de lapso de tempo rápido de células vivas
  • Fototoxicidade mínima e menor fotobranqueamento
  • Recursos de geração de imagens de fluorescência confocal de células vivas
  • Estabilidade durante a geração de imagens de longo prazo e de alta velocidade
  • Facilita a análise quantitativa de grandes quantidades de dados

Detalhes

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Comparação da série CSU

Modelo CSU-W1 CSU-X1
Alta qualidade Básico
Velocidade da imagem
(Máx. fps)
200 2,000 360
Motor do scanner
Velocidade de rotação
(rpm)
1,500-4,000 1,500-10,000
(Variável)
1,800
(Fixo)*2
Recomendado
câmera
tempo de exposição
5msec 0,5msec 33msec
FOV efetivo 17x16mm 10x7mm
Unidade de disco Selecionável até
2 discos
Tamanho do orifício: 50µm, 25µm
1 disco
Tamanho do orifício: 50 µm
Rotação
acionador de posição
sinal
Possibilidade de saída de sinal externo Nenhum*2
Filtros EX Opção
DM Opção (até 3 filtros) Opção
(1 filtro)
EM Opção
(até 10 filtros com
roda de filtro)
Opção
(até 12 filtros com
roda de filtro)
Opção
(1 filtro)
Adição ou
troca de
filtros
No local do usuário: bloco DM e filtros (EX, EM.)
Na fábrica Yokogawa: DM
*1 opção

Comparação entre a CSU e outros sistemas confocais

Modelo CSU Convencional
Confocal de varredura pontual
Convencional
Varredura de fenda Confocal
Outro disco giratório
disco Confocal
Fluorescência epi
(Campo amplo)
Tipo de digitalização Aprimorado por microlentes
varredura de múltiplos feixes
Varredura de feixe único Varredura de linha Varredura de disco (feixe múltiplo ou fenda) Nenhum
Fonte de luz Lasers Lâmpada de arco de Hg ou Xenônio
Detector CCD, EMCCD PMT Linha CCD CCD, EMCCD
Microscópio Flexível Específico Flexível / Específico Flexível
Velocidade de digitalização de
imagem em tamanho real
2000 fps ~1 fps ~120 fps (512X512) <200fps Qualquer
Branqueamento de fotos/
toxicidade das fotos
Baixa Grave Baixa
Confocalidade Alta (confocal X-Y-Z) Modesto
(Compromisso
y-resolução)
Modesto
(Confocal X-Y-Z com pinhole,
Compromisso de resolução y
com varredura de fenda)
Nenhum
Qualidade da imagem
(Fundo)
Alto Bom S/N
(Fundo baixo)
Alta
(média múltipla
necessário)
Modesto Modesto
(Fundo alto
com amostras fracas)
Baixo
(Fundo alto)

Laboratórios de usuários

  • Laboratório Ted Salmon, Departamento de Biologia, Universidade da Carolina do Norte, Chapel Hill
  • Laboratório Waterman-Storer, Laboratório de Morfodinâmica de Células e Tecidos (LCTM), NHLBI (Campus de Bethesda)
  • Laboratório Tim Mitchison, Departamento de Biologia de Sistemas, Harvard Medical School
  • Laboratório Scholey, Departamento de Biologia Celular e Computacional, Universidade da Califórnia, Davis
  • Laboratório Vale, Departamento de Farmacologia Celular e Molecular, Universidade da Califórnia, São Francisco
  • Laboratório Wadsworth, Departamento de Biologia, Universidade de Massachusetts, Amherst
  • Laboratório Kiehart, Departamento de Biologia, Universidade Duke
  • Instalações centrais do HSC Escola de Medicina, Universidade de Utah
  • Centro de Microscopia Biológica de Indiana, Centro Médico da Universidade de Indiana
  • Laboratório Ehlers - Departamento de Neurobiologia, Universidade Duke
  • Laboratório Bob Goldstein, Universidade da Carolina do Norte em Chapel Hill
  • Laboratório Andrew Matus, no Instituto Friedrich Miescher de Pesquisa Biomédica
  • Laboratório de Dinâmica do Desenvolvimento, Escola de Pós-Graduação em Ciências da Vida, Universidade de Tohoku
  • Laboratório Zena Werb, Anatomia, Universidade da Califórnia em São Francisco
  • Laboratório Satoshi Nishimura, Departamento de Medicina Cardiovascular, Universidade de Tóquio
  • Laboratório Oshima, Escola de Pós-Graduação em Estudos de Informação Interdisciplinar, Universidade de Tóquio
  • O grupo de pesquisa Huser na UC Davis
  • Laboratório Nakano, Escola de Pós-Graduação em Ciências, Universidade de Tóquio

Sites úteis

1) Microscopia e geração de imagens Recursos na WWW

Lista completa de todos os aspectos de microscopia e imagem, por Douglas W. Cromey Do Cellular Imaging Core do Southwest Environmental Health Sciences Center, University of Arizona College of Pharmacy, University of Arizona

 

2) O Centro de Biologia Molecular "Severo Ochoa" (CBMSO)

Contém links para informações gerais, laboratórios de microscopia, publicações, cursos e reuniões, sociedades e imagens. Especialmente útil para encontrar workshops de microscopia.

 

3) O Cell Imaging Facility, parte do Departamento de Instalações de Pesquisa Básica do Centro de Ciências da Saúde da Universidade de Utah

Boa explicação do sistema confocal de varredura CSU-Disk por Chris Rodesch

 

4) Site da Molecular Expressions

Administrado pelo Laboratório Nacional de Alto Campo Magnético da Universidade Estadual da Flórida.
Uma das maiores coleções da Web de excelentes imagens de microscopia óptica e informações bastante completas sobre todos os tipos de microscopia.
O Java interativo Tutoriais patrocinado pela Nikon (Nikon MicroscopyU) e pela Olympus (Olympus Microscopy Resource Center) é extremamente útil para aprender não apenas confocal, mas todos os tipos de microscopia e tecnologias relacionadas.

 

Life Science Livros didáticos

Técnicas de Microscopia, Avanços em Engenharia Bioquímica/Biotecnologia Vol.95
Editor serial T. Scheper, Editor de volume J. Rietdorf, Springer (2005)
ISBN-10 3-540-23698-8

Microscopia Confocal para Biólogos
Editado por Alan R. Hibbs, Kluwer Academic / Plenum Publishers (2004)
ISBN:0-306-48468-4(hardback) 0-306-48565-6(e-Book)

Live Cell Imaging, A Laboratory Manual
Edited by Robert D. Goldman & David L. Spector. 2nd Edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press (2010)
ISBN:0-87969-893-4(pbk), ISBN 0-87969-892-6 (hardcover)

Handbook of Biological Confocal Microscopy, 3ª Edição
Editado por James B. Pawley, Springer (2006)

VideoMicroscopia, os fundamentos
Shinya Inoue, Kenneth Spring, Segunda Edição Plenum Press. Nova York,(1997)

ISBN: 0-306-45531-5

Scanner Confocal de Alta Velocidade Direct-View: The CSU-10, Capítulo 2: Aplicações biológicas celulares da microscopia confocal (Methods in Cell Biology)
Shinya Inoue e Ted Inoue
Editado por Brian Matsumoto Academic Press
ISBN:0-12-580445-8 ; 2ª Revisão (2002/12)

Artigos: Tecnologia CSU e suas aplicações

Quantificação e agrupamento de estruturas citoesqueléticas de actina em células vegetais: função do agrupamento de actina no movimento estomático durante ciclos diurnos em células-guarda de Arabidopsis.
Higaki T, Kutsuna N, Sano T, Kondo N, Hasezawa S
submetido.
Aplicação atual e tecnologia de imagens de cálcio de multineurônios funcionais.
Shigehiro Namiki e Yuji Ikegaya
Biological and Farmacêutica Bulletin Vol.32(2009) , No.11
Imagem ao vivo da maturação da cisterna de Golgi em levedura.
Kumi Matsuura-Tokita, Masaki Takeuchi, Akira Ichihara, Kenta Mikuriya e Akihiko Nakano
Nature 441, 1007-1010 (22 de junho de 2006)
Comparação de desempenho entre o sistema confocal de disco giratório de alta velocidade Yokogawa e os sistemas confocais de varredura de ponto único.
E. Wang, C. M. Babbey & K. W. Dunn
Journal of Microscopy, Vol. 218, Pt 2, maio de 2005, pp. 148 ?159
Imagens de tempo de vida de fluorescência seccionadas opticamente usando um microscópio de disco Nipkow e uma fonte de excitação contínua ultrarrápida ajustável.
D.M.Grant, D.S. Elson, D.Schimpf, C.Dunsby, J.Requejo-Isidro, E.Auksorius, I.Munro, M.A. A. Neil, P. M. W. French ,E. Nye G. Stamp, P.Courtney
Optics Letters Vol. 30, No. 24 (2005) 3353
Otimização da Microscopia Confocal de Disco Giratório: Sincronização com o EMCCD ultra-sensível.
F.K.Chong, C.G.Coates, D.J.Denvir, N.McHale, K.Thornbury e M.Hollywood
Anais da SPIE 2004
Sistema de microscópio confocal de disco giratório para microscopia rápida de alta resolução, multimodo, de manchas de fluorescência e imagens de proteína fluorescente verde em células vivas.
Maddox PS, Moree B, Canman JC, Salmon ED
Methods Enzymol. 360:597-617 (2003)
Um sistema de microscópio confocal de disco giratório multiespectral de alta velocidade para microscopia de manchas fluorescentes de células vivas.
Adams, M.C., Salmon, W.C., Gupton, S.L., Cohan, C.S., Wittmann, T., Prigozhina, N. & Waterman-Storer, C.M
Methods, 29, 29?41 (2003)
Microscopia confocal de disco giratório? uma ferramenta de ponta para geração de imagens do tráfego de membrana.
Nakano, A.
Cell Structure Function, 27, 349?355.(2002)
Microscópio confocal de varredura de alta velocidade de 1 quadro/ms com microlentes e discos de Nipkow.
T.Tanaami, S.Otsuki,N.Tomosada, Y.Kosugi. M.Shimizu & H.Ishida
Applied Optics, Vol.41,No.22(2002)
Novos modos de geração de imagens para microscópios de varredura em tandem com arranjo de lentes.
T. F. Watson, R. Juskaitis & T. Wilson
Journal of Microscopy, Vol. 205, Pt 2, fevereiro (2002) 209?212
Microscopia de fluorescência confocal de alta velocidade usando um scanner Nipkow com microlentes para geração de imagens 3-D de uma única molécula de fluorescência em tempo real.
A.Ichihara, T.Tanaami, K.Isozaki, Y.Sugiyama, Y.Kosugi, K.Mikuriya, M.Abe e I.Uemura
Bioimages 4, 57-62(1996)

Artigos: Biologia celular

(Transporte vesicular, dinâmica da actina, dinâmica dos microtúbulos, divisão celular)

Imagens de células vivas de longo prazo e em seis dimensões para o embrião pré-implantacional de camundongo que não afetam o desenvolvimento completo.
Yamagata, K., Suetsugu, R. e Wakayama, T., J. Reprod. Dev., 55: 328-331(2009) "
O DDX-23 de Caenorhabditis elegans, um homólogo do fator de splicing de levedura PRP28, é necessário para a troca de espermatozóides-oócitos e a diferenciação de vários tipos de células.
Konishi, T., Uodome, N., e Sugimoto, A.,Developmental Dynamics 237, 2367-2377(2008)
Determinação da posição do plano de divisão celular.
J. C. Canman, L. A. Cameron, P.S. Maddox, A. Straight, J, S. Tirnauer, T. J. Mitchison, G. Fang, T. M. Kapoor & E. D. Salmon, Nature 424, 1074-1078 (28 de agosto de 2003) "Cover"
Microtúbulos estabilizados por taxol podem posicionar o sulco citocinético em células de mamíferos.
Katie B. Shannon, Julie C. Canman, C. Ben Moree, Jennifer S. Tirnauer e E. D. Salmon, Mol Biol Cell. Setembro; 16(9): 4423?4436 (2005)
Duas cinesinas mitóticas cooperam para conduzir a separação das cromátides irmãs durante a anáfase.
G. C. Rogers, S. L. Rogers, T. A. Schwimmer, S. C. Ems-McClung, .C E. Walczak, R. D. Vale, J. M. Scholey & D. J. Sharp, Nature 427(6972):, 364-370 (2004)
Crm1 é um efetor mitótico de Ran-GTP em células somáticas
Arnaoutov, A., Azuma, Y., Ribbeck, K., Joseph, J., Boyarchuk, Y. e Dasso, M, Nat Cell Biol. Jun;7(6):626-32 (2005).
A congressão nuclear é impulsionada por interações entre microtúbulos citoplasmáticos e extremidades em S. cerevisiae.
J.N. Molk, E.D. Salmon e K. Bloom, JCB, Vol. 172, Número 1, 27-39 (2006)
Fragmentos de centrossomo e microtúbulos são transportados assimetricamente para longe do plano de divisão na anáfase
Nasser M. Rusan e Patricia Wadsworth ,JCB 168 (1) 21?28 (2005)
Os papéis das proteínas motoras baseadas em microtúbulos na mitose: análise abrangente de RNAi na linha celular S2 de Drosophila.
G. Goshima e R.D. Vale,JCB 162(6) 1003?1016 (2003)
A orientação do fuso em Saccharomyces cerevisiae depende do transporte de extremidades de microtúbulos ao longo de cabos de actina polarizados.
Hwang, E., Kusch, J., Barral, Y. & Huffaker, T.C, J. Cell Biol. 161, 483?488 (2003)
Migração celular sem um lamelipódio: tradução da dinâmica da actina em movimento celular mediado pela tropomiosina
S.L. Gupton, K.L. Anderson, T. P. Kole, R.S. Fischer, A. Ponti, S.E. Hitchcock-DeGregori, G. Danuser, V.M. Fowler, D.Wirtz, D. Hanein e C.M. Waterman-Storer ,JCB 168(4) 619-631(2005)
Dinâmica da actina no anel contrátil durante a citocinese em levedura de fissão.
Pelham, R.J. & Chang, F, Nature, 419, 82?86. (2002)
CD8+ effector T cells contribute to macrophage recruitment and adipose tissue inflammation in obesity (Células T efetoras CD8+ contribuem para o recrutamento de macrófagos e inflamação do tecido adiposo na obesidade).
Nishimura S, Manabe I, Nagasaki M, Eto K, Yamashita H, Ohsugi M, Otsu M, Hara K, Sugiura S, Yoshimura K, Kadowaki T, Nagai R, Nature Medicine 8, 914-920 (15 de agosto de 2009)
O envolvimento das células dendríticas pelas células T reorganiza rapidamente o transporte do MHC de classe II.
M. Boes, J. Cerny, R. Masso, M. Op den Brouw, T. Kirchhausen, J. Chenk & H. L. Ploegh, Nature 418, 983- 988 (29 de agosto de 2002) "Cover"
Coordenação funcional de motores de transporte intraflagelar.
G. Ou, O.E. Blacque, J.J.Snow, M.R. Leroux & J.M. Scholey,Nature 436(7050):583-7. (2005).
Análise tridimensional da exocitose do transportador pós-Golgi em células epiteliais
Kreitzer, G., Schmoranzer, J., Low, S.H., Li, X., Gan, Y., Weimbs, T., Simon, S.M. & Rodriguez-Boulan, E, Nature Cell Biol. 5, 126?136. (2003)
Dynamics of Membrane Clathrin-Coated Structures During Cytokinesis (Dinâmica das Estruturas Revestidas de Clatrina da Membrana Durante a Citocinese).
James H. & Wang, Yu-Li Warner, Anne K., Keen, Traffic 7 (2), 205-215 (2006)

Artigos: Neurociência

Direcionamento de profilina induzido por atividade e estabilização da morfologia da coluna dendrítica.
Ackermann, M., e A. Matus, Nat Neurosci. Nov;6(11):1194-200 (2003)
Dynamics and Regulation of Clathrin Coats at Specialized Endocytic Zones of Dendrites and Spines [Dinâmica e Regulação de Camadas de Clatrina em Zonas Endocíticas Especializadas de Dendritos e Espinhos].
T.A. Blanpied, D.B. Scott, M.D. Ehlers, Neuron, Vol. 36, 435?449, 24 de outubro (2002)
Neurabin/Protein Phosphatase-1 Complex Regulates Dendritic Spine Morphogenesis and Maturation (Complexo Neurabin/Proteína Fosfatase-1 Regula a Morfogênese e a Maturação da Espinha Dendrítica).
R.T.Terry-Lorenzo, D.W. Roadcap, T. Otsuka, T.A. Blanpied, P.L. Zamorano, C.C. Garner, S. Shenolikar e M.D. Ehlers, MBC Vol. 16, Edição 5, 2349-2362, maio (2005)
A fosfatidilinositol fosfato quinase tipo I regula a dinâmica da fusão de vesículas de núcleo denso grande.
L.W..Gong , G. D.Paolo, E. Diaz ., G.Cestra , M-E. Diaz, M. Lindau , P.De Camilli , and D. Toomre , PNAS, vol. 102 no. 14 5204-5209 (2005)

Dinâmica do cálcio

Formação de ondas planares e espirais de Ca2+ em miócitos cardíacos isolados.
Ishida, H., Genka, C., Hirota, Y., Nakazawa, H. & Barry, W.H, Biophys. J. 77, 2114?2122 (1999)
Imagem simultânea do metabolismo do fosfatidil inositol e dos níveis de Ca2+ em células PC12h.
Morita,M,Yoshiki, F,e ,Kudo,Y, BBRC 308, 673-678 (2003)
Oscilações de cálcio em células intersticiais da uretra de coelho.
Johnston, L., Sergeant, G. P., Hollywood, M. A., Thornbury, K. D. & McHale, N. G, The Journal of Physiology 565 (2), 449-461 (2005).

Fluxo sanguíneo microvascular

Observação em tempo real de alterações hemodinâmicas em aneurismas glomerulares induzidos por anticorpo anti-Thy-1.
Oyanagi-Tanaka, Y., Yao, J., Wada, Y., Morioka, T., Suzuki, Y., Gejyo, F., Arakawa, M. & Oite, T, Kidney Int. 59, 252?259. (2001)
Imagem in vivo em tempo real de plaquetas, fator tecidual e fibrina durante a formação de trombo arterial no camundongo.
Shahrokh Falati, Prter Gross, Glenn Merrill-Skoloff, Barbara C. Furie & Bruce Furie, Nat Med 8 (10) 1175-1180(2002)

Outros aplicativos

Evidência de geração de ROS pela mitocôndria em células com cadeia de transporte de elétrons prejudicada e danos ao DNA mitocondrial
Hiroko P. Indo,Mercy Davidson,Hsiu-Chuan Yen,Shigeaki Suenaga,Kazuo Tomita,Takeshi Nishii,Masahiro Higuchi,Yasutoshi Koga,Toshihiko Ozawa,Hideyuki J. Majima,Mitochondrion No.7 106?118(2007)

Recursos

Overview:

Descobrindo os princípios básicos da vida por meio de imagens ao vivo do C. elegans

Overview:

Visualização da base comportamental celular da morfogênese epitelial e da progressão do câncer epitelial

Overview:

Microscopia confocal de disco giratório para geração de imagens quantitativas e espectroscopia de flutuação de fluorescência em vários pontos.

Nota de aplicação
Overview:

Ampla e clara
Unidade de scanner confocal

Industries:
Overview:

A observação de longo prazo da mitose por microscopia de células vivas é necessária para descobrir a função da Cohesin na arquitetura nuclear compartimentada, que está ligada às funções nucleares.
Para realizar a observação de longo prazo da mitose, são necessários dispositivos com baixos efeitos fototóxicos em células vivas e que permitam a geração de imagens em alta velocidade. Com o uso da unidade de scanner confocal CSU W-1 para imagens de lapso de tempo, a entrada na mitose, a progressão mitótica e a saída podem ser examinadas.

Overview:

Comparação entre CSU e LSM convencional em filmes 4D.

Overview:

Para investigar a dinâmica interativa das estruturas e organelas intracelulares no movimento estomático por meio da técnica de imagem ao vivo, um sistema CSU foi usado para capturar imagens tridimensionais (XYZN) e imagens com lapso de tempo (XYT) de células-guarda.

Overview:

Unidade de scanner confocal mais rápida, mais brilhante e mais versátil

Industries:
Yokogawa Relatório Técnico
O mundo visto das células
(rd-te-r06002-001)
2.2 MB
Overview:

Lista de publicações selecionadas : CSU-X1

Overview:

Lista de publicações selecionadas : CSU-W1

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Overview:

YOKOGAWA A tecnologia proprietária Spinning Disk permite a geração rápida de imagens confocais em tempo real para aplicações como imagens 3D de alta velocidade e imagens de células vivas de longo prazo. Essas análises de imagens quantificáveis são ferramentas essenciais para a descoberta moderna e precisa de medicamentos.
 

Overview:

YOKOGAWA contribuirá para a evolução tecnológica, especialmente em ferramentas de medição e análise, para ajudar a construir um mundo onde os pesquisadores se concentrarão cada vez mais na interpretação perspicaz dos dados e no avanço do Life Science para beneficiar a humanidade.

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