You can watch webinars by SS2000 users.
①Single Live Cell Mass Spectrometry (SiLC-MS) Analysis
Presenter: Carla Newman (Scientific Leader (Celluar Imaging and Dynamics), GSK)
②Novel tissue imaging, profiling and single-cell sampling approaches
Presenter: Prof. Melanie Bailey (Professorial Research Fellow in the Department of Chemistry at the University of Surrey)
Sistema de amostragem subcelular
O SS2000 é um sistema que coleta amostras automaticamente de regiões específicas de células ou de células inteiras em nível de célula única, enquanto captura imagens de células em cultura com um microscópio confocal. Como as células em cultura não precisam ser destacadas, as informações morfológicas e de posição são mantidas.
Recursos de amostragem
- Operação automatizada.
- Controle preciso da pipetagem dos trabalhos de localização.
- Amostragem com informações de localização e morfologia.
- Imagens de alta resolução e análise de imagens usando microscopia confocal.
- Função de incubadora para manter a atividade celular.
Casos de uso
- Os componentes intracelulares podem ser amostrados em um nível de célula única. Isso inclui componentes intracelulares que são difíceis de serem amostrados por métodos bioquímicos, como organelas sem membranas lipídicas.
- Ao fazer a amostragem mantendo as informações de posição, é possível fazer a amostragem e analisar as células normais adjacentes às células cancerosas e as células normais localizadas longe das células cancerosas.
- A amostragem é possível enquanto se mantém as informações morfológicas. Permite que células com diferentes alterações morfológicas possam ser amostradas e comparadas.
- Diferentes partes de um neurônio, como o corpo celular ou o axônio, podem ser direcionadas para amostragem.
- A clonagem de célula única é possível a partir de células específicas ou células com comportamento específico sob observação microscópica, como células transfectadas ou células resistentes a vírus. Ao combinar várias técnicas de análise de imagem, é possível fazer uma clonagem precisa e eficiente.
- Várias amostras podem ser coletadas no mesmo poço para análises que exigem um volume de amostra.
Detalhes
Amostragem subcelular
Diferentemente dos dispositivos de isolamento de células existentes, o SS2000 pode não apenas isolar uma célula inteira, mas também coletar amostras apenas do local-alvo dentro da célula. É possível amostrar seletivamente o citoplasma e as regiões que contêm organelas-alvo.
Após a coloração dos núcleos das células HeLa (azul), citoplasma (verde) e mitocôndrias (vermelho), uma região rica em mitocôndrias (seta) do citoplasma foi amostrada.
Manutenção de informações posicionais e morfológicas das células
Como somente as células-alvo podem ser amostradas sem descolar as células em cultura, é possível fazer a amostragem mantendo as informações morfológicas e de posição.
Células MDCK normais e células MDCK anormais marcadas com fluorescência verde foram co-cultivadas em uma proporção de 50:1. Uma célula normal adjacente à célula anormal que exibia sinais fluorescentes (setas) foi amostrada.
Amostras de alta usabilidade
As amostras podem ser coletadas em placas e microplacas de PCR e coletar várias amostras no mesmo poço. As amostras também podem ser coletadas enquanto são mantidas na ponta de vidro sem serem ejetadas. O local de coleta tem uma função de resfriamento para suprimir a degradação da amostra e uma função de incubadora para manter o ambiente de cultura. Essas amostras podem ser usadas para análise genética, espectrometria de massa e clonagem de célula única.
Imagem de células vivas com microscopia confocal
O SS2000 utiliza produtos de geração de imagens de células vivas desenvolvidos pela Yokogawa. A geração de imagens 3D de alta velocidade e alta resolução é possível usando nossa tecnologia exclusiva de microscópio confocal. As amostras podem ser coletadas de células-alvo sob um microscópio confocal em um ambiente de incubadora. A fotografia com lapso de tempo também é possível, permitindo a captura de alterações dinâmicas no site célula alvo. Como é possível registrar imagens em movimento durante a amostragem e imagens antes e depois da amostragem, é possível comparar os resultados da análise das amostras coletadas com os dados de imagem das células.
As células-alvo e as posições de amostragem podem ser selecionadas automaticamente pela análise da imagem. (Os alvos podem ser selecionados automaticamente como formato das células, tamanho dos núcleos, densidade das organelas etc.)
Especificações do produto
| Funções de amostragem automática | Diâmetro da ponta | 3μm, 5μm, 8μm, 10μm |
|---|---|---|
| Ambiente do carregador da incubadora | 37℃, 5％CO2, umidificado | |
| Ambiente do carregador de coleções | 37℃, 5％CO2, umidificado (para cultura) / 4℃ (para resfriamento) | |
| Recipientes compatíveis com o carregador de coleta | Placa de PCR de 96 poços (0,1 ml, 0,2 ml) Placa de cultura de múltiplos poços (96 poços) | |
| Precisão de posicionamento da amostragem | Resolução designada axial XYZ: 0,1μm | |
| Funções de geração de imagens | Método de varredura confocal | Confocal de disco duplo largo de Nipkow aprimorado com microlentes |
| Recipientes compatíveis com o carregador da incubadora | Quando a célula de amostragem: Pratos de φ35 mm *1 Microplaca (6 poços, 24 poços, 96 poços) |
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| Ao observar a célula: Pratos de φ35 mm *1 Microplaca (6 poços, 12 poços, 24 poços, 48 poços, 96 poços, 384 poços, 1536 poços) Copo de vidro *2 |
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| Comprimento de onda do laser de excitação | 405, 488, 561, 640nm (Uniformizador instalado) | |
| Filtro de emissão | Tamanho do filtro: φ25nm, número máximo de slots: 10 (comutação elétrica), velocidade de comutação adjacente: 100msec | |
| Iluminação de transmissão | Campo luminoso, fonte de LED | |
| Lente objetiva | Lente seca: 4x, 10x, 20x, 40x Lente de longa distância de trabalho: 20x, 40x Observe que somente a lente seca de 40x pode ser usada para amostragem de células. |
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| Foco Z | Motor Z elétrico, resolução designada: 0,1μm | |
| Palco elétrico | Resolução designada axial XYZ: 0,1μm | |
| Autofoco | Autofoco a laser | |
| Câmera | Câmera sCMOS 2.000 x 2.000 pixels Tamanho do pixel: 6,5 x 6,5 μm | |
| Outros | Estação de trabalho para fins especiais | Estação de trabalho para amostragem, medição, análise, tela de 24 polegadas x2 |
| Software de medição | Funções de medição (2D, 3D, lapso de tempo, imagem de mapa), visualização de dados de medição e amostragem, funções de relatório (dados de imagem, dados de vídeo), amostragem de células inteiras, amostragem de componentes intracelulares | |
| Software de análise | Funções de análise (3D, Tile, Label-free, Análise de textura, Aprendizagem profunda, Gating), visualizador 3D, funções de gráfico, funções de relatório (dados de imagem, dados de vídeo, EC50, IC50, fator Z) | |
| Dimensões externas, peso | Unidade principal: L1.217 x P643 x A595 mm, 145 kg Caixa de utilidades: L275 x P432 x H298 mm, 18 kg Misturador de gás: L275 x P432 x H298 mm, 10 kg Estação de trabalho para fins especiais: L172 x P471 x A414 mm, 14 kg Tela: L 531 x P 500 x A 166 mm, 5,6 kg |
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| Ambiente operacional | Temperatura: 15 a 30°C Umidade: 30 a 70％RH sem condensação |
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| Energia consumo | Unidade principal, caixa de utilidades e misturador de gás: 1.200VAmax Estação de trabalho: 950VAmax Tela: 42VAmax x 2 |
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| Formatos de dados (software de medição) | Imagens capturadas: TIFF de 16 bits (OME-TIFF, TIFF) Dados da imagem de saída : TIFF, PNG, JPEG Saída de dados de vídeo : WMV, MPEG4 |
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Formatos de dados (software de análise) |
Dados numéricos : CSV Dados da imagem de saída : TIFF, PNG, JPEG Dados de vídeo de saída : WMV, MPEG4 |
*1 É necessário um suporte de amostra e, com ele, é possível instalar até 3 amostras.
*2 É necessário um suporte de amostras e, com ele, podem ser instaladas até 4 amostras.
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Recursos
Nos últimos anos, a pesquisa em células únicas tornou-se cada vez mais popular, mas com técnicas analíticas mais sensíveis, tornou-se possível analisar componentes intracelulares específicos, como organelas, em nível de célula única.
O SS2000 é um sistema inovador que pode coletar amostras de componentes intracelulares em nível de célula única usando uma ponta (capilar de vidro) com um diâmetro de vários micrômetros durante a geração de imagens com um microscópio confocal. Nesta nota de aplicação, apresentamos um caso em que os componentes intracelulares foram amostrados pelo SS2000 e a análise genética foi realizada por qPCR.
Notícias
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Press Release Nov 30, 2021 Yokogawa Desenvolve o Single Cellome System SS2000 para amostragem subcelular
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News Brief Abr 25, 2024 A Yokogawa ajuda a revolucionar o campo da lipidômica de célula única
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